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证据。（1）获得专性厌氧呼吸的酵母菌株利用基因敲除技术破坏酵母菌（填细胞器）的功能，导致该细胞器不能产生ATP。②构建含有ATP转运蛋白基因X的质粒2。已知在基因X和质粒1上均无EcoRI和NotI酶切位点。研究者采用引物P1（含EcoRI识别序列）和P2（含NotI识别序列）对基因X进行扩增，并采用引I物P3（含EcoRI识别序列）和P4（含NotI识别序列）对质粒1进行扩增，使质粒1线性化，再经酶切、连接，使基因X与质粒1重组为质粒2。上述所选引物的端分别添加相应的限制酶（用图中字母回答）。P1(EcoRI)老业基因X质粒1P2(Not I)+质粒2基因X启动子（转录方向从左至右）启动子③将质粒2转人菌株A中，筛选获得菌株B。高渗溶液酵母细胞细胞壁裂解酶高渗溶液细胞壁再生膜融合筛选融合菌株大肠杆菌菌株B①大肠杆菌细胞壁为双层结构，内层为坚固的肽聚糖，外层为脂质双分子层膜结构。融合细胞中的大肠杆菌形态正常且具有活性，该过程中菌株B不需要进行酶解去壁，理由是②在以为唯一碳源的选择培养基上筛选到能够增殖的融合菌株，而不能用葡萄糖为碳源，原因是。其中酵母菌为大肠杆菌提供，大肠杆菌为酵母菌提供生物学试题（LD2）第8页（共8页）