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节车服立柱对齐根立设各®平高考2年模拟3年高考习体排24.(12分)热带无爪第丫也称热带螨)是热带和亚热带地区家居环境中尘螨的主要种类之一,其中的B1ot5蛋白是导致动物过敏的主要过敏原。某科研小组进行了热带璃过敏证的DNA疫苗即基因与pVAX质粒重组的基因表达载体)的相关研究,下图为研究过程中的部分流程图。回答下列问题:EcoR]Xhol引物B注:Ot复制原点a链anR:卡那霉素抗性基因T7:,置肩动子b链制识别序列及切制位点如下HindI A:AGCT引物AEeORL GAATTCCITCGAG转录方向B1o5基因T7TICTAGAB1ot5基因7EcoRI转染-Xhol鲜pAX,质粒Xbal提取总蛋白入胚胎肾细胞终止子Kan终止子(I)接种到机体的DNA疫苗被细胞吸收后!Blot5基因凳过程合成Blot5蛋白。该蛋白作为,刺激机体产生特异性免疫应答,从而起到免疫保护作用。为烧外源B5基因在受体细胞里能高效表达,科研人员需对其mRNA密码子优化使mRNA疹有更多受体细随中使用颜率高的密码子,通改适汤尘序列可达到士述自的。(2)利用PCR技术封扩增Blot5基因时,需要·酶,该酶能够使脱氧核苷酸从引物的3_端开始连接。要使PCR扩增产物和pVX质粒正确重组,需在引物A和引物B的5'端分别添加的识别序列。(3)目的基因转染后,一不列检测人胚胎肾细胞中是否舍有B05基因的方法可行的是.①将人胚胎肾细胞培养液中加人卡那霉素检测其是否表现出抗性人②提取人胚胎肾细胞中的总DNA,利用DNA分子杂交技术进行检测V③提取人胚胎肾细胞中的总DNA,利用PCR技术进行特异性扩增,并电泳检测)(4)利用技术,可检测人胚胎肾细胞中是否含有Bot5蛋白。除此之外,还需在个体水平检测该DNA疫苗是否能诱导机体产生体液免疫和细胞免發应答。情完善下列实验流程:将实验小鼠均分为两组→用免疫实验组小鼠,并以未免疫的正常小鼠为对照组→一段时间后,检测小鼠体内的水平。高三生物学试卷第9页(共10页)无效清在各题目的各题区度内作各,超事色矩形边框限定区域的答察无效在各题
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