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GAATTC启动子EcoR IEcoRICTTAAG-Sau3AIBamHI Sau3AI BamHIHSA TBamH IGGATCC-复制原点终止子CCTAGGSau3AIEcoRIEcoRIGATC-Sau3A ICTAG-抗生素抗性基因甲U丙图2(1)从人体细胞中直接提取的SA基因,导入到大肠杆菌细胞中不能表达,原因可能是。为了获得能在大肠杆菌细胞中表达的SA基因,可从人体的细胞中提取mRNA,通过反转录获得cDNA(双链),再利用PCR进行扩增,该过程需向反应体系中加入、4种脱氧核苷酸、引物和Mg2+,若扩增后得到了32个HSA基因,则该过程共需要个引物。(2)构建基因表达载体时,不能选择限制酶Sau3AI切割目的基因,原因是,为了防止目的基因与质粒间的任意连接,应选择限制酶Sa3AI、EcoR I切割质粒,选择限制酶充分切割目的基因,质粒上抗生素抗性基因的作用是(3)将目的基因导入大肠杆菌时,常用处理细胞。为了检测水稻胚乳细胞中是否合成了HSA蛋白,可用方法;若胚乳细胞中含有SA基因,但是检测不到HSA蛋白,原因可能是高三生物第9页共9页
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