2024届全国100所名校单元测试示范卷·生物[24·G3DY(新高考)·生物-R-必考-HUN]一试题

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3.(I0分)常用的PCR技术有实时荧光定量PCR、RT-PCR、重叠延伸PCR等,其中重叠延伸PCR技术是一种通过寡聚核苷酸链之间重叠的部分互相搭桥、互为模板,通过多次PCR扩增,从而获得目的基因的方法。该技术在扩增较长片段的DNA、不同来源的DNA片段拼接、基因的定点诱变等方面具有广泛的应用前景。利用重叠延伸PCR技术进行定点突变可以实现对纤维素酶基因进行合理改造,其过程如图所示。回答下列问题:引物a引物cX0K00X第PCRI引物b引物dPCR2酸产物AB第产物CD1@酸AB上链第CD下链②突变位点突变产物ADPCR3大量突变产物AD(1)PCR定点突变需要设计的引物是(2)在第一阶段为获得产物AB和产物CD,必须将引物a、b和引物c、d置于不同反应系统中,这是因为(3)新冠病毒常用“荧光RT-PCR技术”进行检测。①“荧光RT-PCR技术”所用的试剂盒中通常都应该含有、荧光标记的核酸探针、引物、dNTP、缓冲体系。②用微量移液管向微量离心管中依次加入各组分,稍微进行,使反应液集中在微量离心管底部,将微量离心管放入PCR仪,设计好PCR仪的循环程序,进行PCR反应(4)在检测过程中,随着PC的进行,反应产物不断累积,“杂交双链”荧光信号的强度也等比例增加。可通过荧光强度的变化监测产物量的变化,从而得到一条荧光扩增曲线图。卜台期」指数扩增阶段a阈值Cycle(循环数)】①“台期”出现的原因最可能是②理论上,在检测过程中有荧光标记的“杂交双链”出现,则说明检测结果呈(填“阴”或“阳”)性,但为了保证检测结果的准确性,一般要达到或超过阈值时才确诊。现有甲、乙两个待检样本,检测时都出现了上述形态的曲线,但甲的a点比乙的a点明显左移。请给这种结果作出科学合理的解释(试剂盒合格且正常,操作过程规范且准确):【答案】(1)引物b、引物c(2)引物b和引物C对应的碱基之间大部分可以配对,在一个反应系统中配对后会失效(3)①逆(反)转录酶、热稳定DNA聚合酶(或Taq酶)②离心(4)①试剂盒中的原料、引物和探针数量一定,超出一定的循环数后,荧光标记的“杂交双链”不再增加②阳甲样本中的新冠病毒含量更高,达到阈值所需的循环数更少·47·